Модифицированная методика определения ботанического происхождения пыльцевой обножки медоносных пчёл
Пчеловодство / 01 апреля 2012
Разработан экспресс-метод определения ботанического происхождения пыльцевой обножки медоносных пчёл. Он позволяет проводить палинологический анализ без дополнительных затрат. Рекомендуем в рамках апимониторинга.
Получение высококачественной сельскохозяйственной продукции напрямую зависит от экологической обстановки данной территории. Учитывая ситуацию в нашей стране контроль состояния окружающей среды нужно осуществлять безоговорочно. Кроме традиционных видов мониторинга в последние годы интенсивно разрабатывается апимониторинг. В качестве адекватного индикатора загрязнителей биоценозов используют пыльцевую обножку медоносных пчёл. При изучении уровня контаминации окружающей среды тяжёлыми металлами точность оценки повышается с увеличением количества индикаторов, поэтому необходимо определить ботаническое происхождение и количество растений, ставших источником пыльцы при формировании пчёлами обножки. Цветовая оценка принадлежности обножки к какому-либо из видов растений не может быть объективной и требует проведения палинологического анализа.
Существующие в настоящее время методики приготовления препаратов для палинологического анализа трудоёмки, требуют комплексного использования реактивов, пригодны, в большей степени, для создания и хранения эталонных образцов. Для установления ботанического происхождения обножки в целях её использования в рамках апимониторинга необходим экспресс-метод, отличающийся от существующих быстротой и доступностью.
Цель работы заключалась в разработке методики определения ботанического происхождения пыльцевой обножки медоносных пчёл.
Предлагаемая методика включает в себя следующее.
1. Средства измерения, вспомогательные устройства и материалы: микроскоп биологический Микромед-2, микрометр окулярный винтовой МОВ-1-16Х, бинокуляр МБС-10, препаровальная игла, стекло предметное по ГОСТ 9284, стекло покровное по ГОСТ 6672, палочка стеклянная, пинцет.
2. Реактивы: вода дистиллированная по ГОСТ 6709, этиловый спирт 96%, эфир.
3. Отбор и подготовка образцов. Полифлёрные образцы пыльцевой обножки медоносных пчёл вначале делят вручную по цветовой гамме на монофлёрные.
Энтомофильные растения собирают на припасечных участках с территории, определяемой радиусом лёта пчёл. Их видовая идентификация проводится по определителям.
Предметные стекла предварительно моют с добавлением детергента и обезжиривают в смеси (1:1) 96% этилового спирта и эфира.
4. Проведение испытания. Приготовление препарата пыльцевой обножки. Одну гранулу монофлёрной обножки помещают на предметное стекло и размачивают до частичного растворения в капле дистиллированной воды. На это же стекло располагают вторую повторность обножки этого цвета (для двух параллельных измерений). Препарат накрывают покровными стёклами.
Приготовление препарата пыльцы. Под бинокуляром при помощи препаровальных игл выделяют пыльцу из пыльников с нативных или гербарных растений на предметные стёкла в каплю дистиллированной воды и накрывают покровным стеклом.
Микроскопирование препаратов. Для исследования морфологии пыльцевых зёрен проводят микроскопирование препаратов. Просмотр пыльцевых зёрен пыльцевой обножки и энтомофильных растений производят под микроскопом при увеличении в 400 раз. Измерение экваториального диаметра (Э.д.) и длины полярной оси (П.о.) проводят у 5 пыльцевых зёрен, случайно попавших в поле зрения, окулярным винтовым микрометром.
5. Обработка данных. Статистическую обработку данных, полученных при измерении пыльцевых зёрен, проводят с использованием методов вариационной статистики (вычисление средней арифметической, среднего квадратического отклонения, ошибки средней арифметической).
6. Идентификация (рисунок). Идентификацию пыльцевых зёрен обножки проводят путём их сравнения с пыльцевыми зёрнами растений, собранными на исследуемой территории. Если место сбора обножки не известно, то определение проводят по атласу пыльцы энтомофильных растений юга Западной Сибири, составленного нами для этой цели, и по определителю.
Микрофотографии сделаны фотоаппаратом Sony Ув. микроскопа х400 (1) и при увеличении микроскопа х400 и фотокамеры х6,4 (2).
Данная методика позволяет устанавливать ботаническое происхождение пыльцевой обножки медоносных пчёл в рамках проведения апимониторинга окружающей среды в сжатые сроки и без существенных затрат.
Палинологический анализ пыльцевой обножки и пыльцы растений:
I Пыльцевые зёрна обножки тёмно-коричневого цвета (Э.д. = 17,41 ± 0,14; П.о. = 21,72 ± 0,52); II Пыльцевые зёрна кровохлёбки лекарственной, Sanguisorba officinalis L. (Э.д. = 16,66 ± 0,45;П.о. = 22,91 ± 0,18).
М.В. Волкова, ГНУ Сибирский научно-исследовательский и проектно-технологический институт переработки сельскохозяйственной продукции, г. Новосибирск
Источник: BORONA.net
